Одной из главных тем телесериала «Вавилон-5» является социальное и культурное взаимодействие между различными цивилизациями, и космические станции серии «Вавилон» задумывались именно как место для политических, экономических и культурных контактов. На станции «Вавилон-5» представлены пять доминирующих цивилизаций и несколько десятков менее могущественных. Менее могущественные расы образуют Лигу неприсоединившихся миров, созданную в результате Дилгарской войны, произошедшей за 30 лет до начала сериала.
Земной Альянс
Земной Альянс был основан в конце XXI века после Третьей мировой войны, сначала как вольное содружество государств, ставшее затем сплочённым альянсом, включающим в себя почти каждую нацию на Земле. Альянс контролирует колонии по всей галактике, несмотря на то, что все колонии имеют богатую историю повстанческого движения за независимость, особенно на Марсе. Альянс представляет собой демократию с однопалатным парламентом и избираемым президентом. В одном из эпизодов второго сезона («А теперь — слово», англ. «And Now For A Word») упоминается, что Альянс состоит из 24 колоний и поселений в дюжине звёздных систем[не подтверждено]. Альянс является одной из пяти главных сил во вселенной «Вавилона-5», с репутацией, завоёванной во время Дилгарской войны и укреплённой во время войны между Землёй и Минбаром.
По окончании войны между Землёй и Минбаром, Альянс принялся развивать межзвёздную торговлю, несмотря на противодействие влиятельных фракций, стремившихся проводить политику ксенофобии и изоляционизма. Вслед за убийством президента Луиса Сантьяго и приходом к власти Моргана Кларка последовали организация новым президентом тайной полиции («Ночной дозор»), роспуск Сената и превращение Земли и её колоний в тоталитарное фашистское государство. Вдобавок к этому набрал силу Пси-корпус, могущественная квазивоенная организация, призванная обеспечить контроль над телепатами среди людей. Всё это привело к гражданской войне, ставшей одной из частей финальной Войны Теней.
Минбарская федерация
Когда человечество ещё только начинало осваивать космические полеты в XX веке, Минбарская федерация уже была развитой цивилизацией и владела технологиями гиперпространственных полетов уже несколько столетий. Это кастовое общество, все его члены входят в одну из трёх каст — мастеров, воинов и жрецов. Высшим органом власти является Серый Совет, состоящий из девяти представителей, по трое от каждой касты. Такой порядок был заведён Валеном, древним минбарским пророком, предсказавшим возвращение Теней. Минбарцы — гуманоиды, как правило с бледным оттенком кожи и достаточно худощавого телосложения. Тем не менее, физически минбарец сильнее, чем человек того же сложения. У них нет волос, а их головы имеют сзади костяной гребень сложной формы. Родной мир минбарцев холоднее, чем Земля, он седьмой по удалению от своей звезды. Длительное нахождение минбарца при температуре выше 30 °C может привести к его гибели.
Республика Центавр
Центавр когда-то была великой империей, а ныне клонится к упадку. Центавриане — гордый и аристократичный народ, управляемый императором и сенатом, состоящим из дворян, который называется Центарум. Центаврийские мужчины носят прическу в виде веерообразного гребня, его высота означает ранг в обществе.
Центавриане были первой внеземной расой, открыто вступившей с людьми в контакт (не считая некоторых рас, издавна тайно наблюдавших за людьми и посещавших Землю). Центавриане поначалу пытались обмануть людей, убедив их, что Земля является давно забытой и потерянной колонией Республики, но эта уловка была раскрыта, когда земные учёные добыли образец ДНК центавриан. Контакт между Центавром и Землёй привёл к огромному технологическому скачку и превращению человечества в одну из основных сил в галактике. Именно центавриане продали Земному Альянсу технологию «гиперпространственных ворот», что позволило людям начать колонизацию космоса.
Режим Нарна
Подобно человечеству, нарны являются «молодой расой». Много лет нарны находились под оккупацией центавриан и по сей день ненавидят своих поработителей за проявленную тогда жестокость.
Режим Нарна управляется советом Кха'Ри. Религия нарнов базируется на учениях пророков и их священных писаниях, самым известным из которых является Книга Г'Квана.
Нарны гуманоиды, высокие, плотного телосложения. Волос нет. Кожа желтоватая, покрыта коричневыми и/или зелёными пятнами. Несмотря на некоторое сходство с ящерицами, нарны относятся скорее к сумчатым.
Ворлонская империя
Ворлонцы древняя и технологически очень развитая раса, одна из последних рас Предтеч. Тщательно скрывают свою природу от более молодых рас. О ворлонской истории известно очень мало, за исключением того, что они сыграли важную роль в победе над Тенями в предыдущей Великой Войне. Тысячи лет ворлонцы наблюдали за более молодыми расами и манипулировали ими.
Об их внешности также известно очень мало — контактируя с другими расами, ворлонцы надевают специальный закрытый костюм. В одной из серий ворлонец покидает свой костюм, и представитель каждой из рас, кроме центаврийцев, видит его как ангелоподобное существо с крыльями за спиной, но с лицом существа своей расы, причем, принадлежащее известному религиозному вождю, или, по крайней мере, ассоциируемое с таковым. Центаврианин Лондо Моллари не смог увидеть ничего, кроме неясного образа.
Тени
Тени (имя, данное им более молодыми расами, ибо их самоназвание труднопроизносимо, в нём около десяти тысяч звуков) — древнейшая раса из оставшихся Изначальных. Более миллиона лет назад Тени воевали с оставшимися Изначальными, и десять тысяч лет назад скрылись, потерпев грандиозное поражение . Тысячу лет назад они снова вернулись и вновь были побеждены ворлонцами и молодыми расами, которыми предводительствовали минбарцы под руководством Валена. После этого Тени рассеялись по галактике, выжидая удобной возможности для возвращения к власти.
Определяющая философия Теней — хаос и конфликт. Они полагают, что выживать должны лишь достойнейшие, и что лишь через войну и хаос «сильные» цивилизации могут максимально развить свой потенциал[не подтверждено]. Оправдывая данное им имя, они используют и порабощают другие расы или подталкивают их к войне друг с другом, сами при этом оставаясь невидимыми.
Их физический облик напоминает насекомых, хотя, возможно, это всего лишь скафандр. Их технология, как и у ворлонцев, органическая, в качестве центрального процессора в их кораблях должно использоваться разумное существо, что даёт возможность использовать телепатов для борьбы с ними.